Аналитическое центрифугирование

В настоящее время разработано несколько способов центрифугирования в градиенте плотности. Подробное описание данных методов можно найти в практических пособиях по биохимии и молекулярной биологии.

Аналитическое центрифугирование применяют при исследовании свойств предварительно очищенных внутриклеточных структур или органических молекул. При использовании небольших количеств препарата метод позволяет определить гомогенность материала, размеры и массу частиц, конформацию и молекулярную массу молекул. Седиментационный анализ проводят с использованием ультрацентрифуг, имеющих роторы и регистрирующие системы особой конструкции, позволяющие наблюдать за седиментацией структур в центробежном поле. Аналитические ультрацентрифуги позволяют развивать высокие скорости и создавать центробежную силу до 500 тыс. G.

Возможности и применение методов центрифугирования. Центрифугирование как метод фракционирования частиц, различающихся по массе И по размеру, находит широкое применение в биологии. Дифференциальное центрифугирование и центрифугирование в градиенте плотности позволяют получить фракции отдельных органелл клетки из гомогенатов разрушенных тканей и произвести очистку их от примесей. Изопик — ническое центрифугирование в градиенте плотности делает возможным разделение смеси близких по молекулярной массе и размеру частиц на основе различий в их плавучей плотности. Зонально — скоростное центрифугирование и равновесное центрифугирование в градиенте плотности позволяют разделять высокомолекулярные соединения на основе их молекулярной массы. Таким образом, центрифугирование является достаточно эффективным препаративным методом разделения и очистки компонентов в жидких смесях. Кроме того, ультрацентрифугирование лежит в основе седиментационного анализа, используемого для определения молекулярной массы частиц. Это делает центрифугирование важным аналитическим методом.