Варьирование времени центрифугирования

Варьирование времени центрифугированияДля частицы, по форме близкой к сферической, время осаждения в жидкой среде рассчитывают на основе закона Стокса, с изменениями Сведберга и Никольса.

При одной и той же силе разделение частиц по плотности и по размеру достигается либо путем варьирования времени центрифугирования, либо за счет распределения седиментирую — щихся частиц вдоль пробирки, устанавливающегося через определенный промежуток времени. Для разделения частиц, различающихся по плотности и размеру, можно также изменять центробежную силу. Центрифугируя суспензию при ступенчатом увеличении центробежной силы, выбранной в соответствии со свойствами частиц, можно добиться поэтапного осаждения частиц разной плотности и размера.

Плотность и вязкость среды являются определяющими факторами при разделении компонентов гетерогенных систем. Варьируя эти параметры, можно добиться разделения и очистки близких по размерам и массе частиц.

Осаждение частиц несферической формы не подчиняется приведенному выше уравнению, поэтому частицы с одинаковой массой, но разной формы осаждаются при разных скоростях. Эту особенность используют для исследования конформации биооргани — ческих молекул методом ультрацентрифугирования.

Способы центрифугирования. Центрифугирование в зависимости от целей его применения принято подразделять на препаративное и аналитическое.

Препаративное центрифугирование — метод разделения биологического материала с целью получения достаточно больших количеств гомогенных фракций внутриклеточных структур. Он может быть использован также для получения чистых препаратов органических молекул, например белка, ДНК из предварительно очищенных препаратов.

Препаративное центрифугирование подразделяют на дифференциальное, зонально-скоростное, изопикническое и равновесное в градиенте плотности.

Copyright © 2017. All Rights Reserved.